TẠO DÒNG ĐỘT BIẾN KÉP ahl/beh3 BẰNG PHƯƠNG PHÁP THỤ PHẤN CHÉO TRONG NGHIÊN CỨU KHÁNG STRESS PHI SINH HỌC Ở CÂY Arabidopsis

Tóm tắt

Đột biến đơn dòng ahl và beh3 được tạo ra bởi sự gắn chèn T-DNA ở các gen AHL, mã hóa cho enzyme tham gia quá trình sulfate hóa, và gen BEH3, mã hóa cho yếu tố tham gia điều hòa đáp ứng tín hiệu hormone Brassinosteroid, ở Arabidopsis. Các dòng đột biến đơn gen này đã được chứng minh có khả năng chống chịu khác nhau đối với các stress phi sinh học như thẩm thấu, hạn hán hay độ mặn phụ thuộc vào vai trò điều hòa của Proline, Cystein và hormone Brassinosteroid nội sinh. Sự kết hợp của cả hai đột biến này là phương pháp nghiên cứu mối liên quan trực tiếp của các yếu tố nội sinh nói trên trong đáp ứng stress ở Arabidopsis, tuy nhiên phương pháp tạo đột biến T-DNA rất phức tạp và đòi hỏi kỹ thuật cao. Ở nghiên cứu này, tác giả đã sử dụng phương pháp thụ phấn chéo để lai giữa hai dòng đột biến đơn ahl và beh3 nhằm tạo ra dòng đột biến kép ahl/beh3. Sử dụng phương pháp PCR khảo sát trên genomic DNA của các cây thụ phấn chéo thành công, dòng đột biến kép ahl/beh3 được xác định tại cả
hai vị trí AHL và BEH3. Kết quả đã thu được 18 cây mang đột biến kép ahl/beh3. Sàng lọc phân tử cho thấy, các gen chỉ thị liên quan đến sự đáp ứng stress thẩm thấu biểu hiện ở dòng đột biến kép ahl/beh3 tương tự so với các dòng đột biến beh3. Điều này cho thấy BEH3 có thể là upstream của AHL trong con đường đáp ứng stress ở Arabidopsis.